代做實驗流式細胞術檢測服務
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代做實驗流式細胞術檢測服務
詳細信息 上海卓康以質量為本,樹立“卓康質量”是公司的發(fā)展目標。我們一直加倍努力,竭盡全力做到不辜負您的支持與信賴。同時公司也離不開廣大客戶的幫助支持,真誠邀請國內外有實力的實驗室、生物技術公司合作,共同發(fā)展。
目前卓康提供的服務范圍包括:生物合成siRNA、shRNA的制備;轉錄編碼shRNA的DNAs、轉錄編碼shRNA的質粒載體訂購;siRNA靶位的設計和實驗選擇分析;siRNA相關試劑和RNA技術相關產品的代理銷售;重組病毒構建包裝;基因蛋白表達、載體構建、多克隆抗體和單克隆抗體制備;多種細胞學服務;常用的分子生物學試劑、實驗儀器、實驗耗材銷售等。
卓康在分子生物學和免疫學實驗技術,特別抗體制備技術方面同樣具有豐富經(jīng)驗,提供快速、優(yōu)質、性價比高的實驗服務。
十三、代做實驗流式細胞術檢測服務
1、檢測指標:
1)DNA倍體分析、DNA含量分析、細胞周期、細胞凋亡。
2)細胞表面抗原分析:淋巴細胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相關抗體分析、HLA-B27、PNH相關抗原檢測(CD55/CD59)、胞內細胞因子檢測等。
3) 其它指標:細胞內鈣離子測定、耐藥基因檢測(p170、MRP、LRP)及凋亡基因(P53、CD95、c-erb B2、Bcl-2及Bax等。
2、樣本及來源:
1) 單個細胞:1~2×106 個細胞左右;來源于人、小鼠、大鼠或其它。
2) 外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;來源于人、小鼠、大鼠或其它。
3、收費標準:
編號 規(guī)格 價格(¥)
FWO-1 單色標記 50/T
FWO-2 雙色標記 70/T
FWO-3 三色標記 90/T
說明:
1、 實驗所用的流式細胞儀為COULTER EPICS XL。
2、 送檢樣本量:
1)單個細胞:1~2×106 個細胞左右;來源于人、小鼠、大鼠或其它。
2)外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;來源于人、小鼠、大鼠或其它。
3、 用戶需要進行流式細胞儀檢測時須提前預約,同時說明實驗目的、方法等。一次送檢標本數(shù)不少于10個。如果一次送檢標本總數(shù)不足10個,每個測試費用為標準收費×2。
4、 我公司在正式接受實驗委托一周內交付實驗結果。所提供實驗結果忠實于樣本的實際情況。
5、 用戶須一次性全額預付實驗費。
6、 部分常用熒光探針,如PI等,我公司可免費提供,;特殊標記物,如CD抗體等,用戶須另行購買,也可委托我公司代購;用戶所提供抗體應可與樣本發(fā)生特異性識別反應。
7、 由用戶提供的樣品或試劑所致的實驗問題由用戶負責。
8、 請在表中說明檢測具體要求(可另附頁),由于填寫資料不詳所致任何問題由用戶負責。
9、 請在送樣的同時提供樣本來源及處理方法等信息,樣品檢測后原則上本公司不負責保存。
附:流式細胞術檢測樣品推薦制備方法:
A. 直接標記抗體(FITC標記抗體):
(1) 收集1×106個細胞,800rpm離心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2) 用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘,800rpm離心5min去上清。加2ml PBS重懸洗滌細胞,800rpm離心5min。
(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重懸細胞,冰上孵育10min,800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和飽和劑量的熒光標記抗體(5×105個細胞/20ul抗體)的PBS ,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待測即可。
(4) 用流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
B. 未標記抗體間接免疫熒光標記法:
(1)收集2×106個細胞,用冷的PBS 2ml 洗滌細胞一次,800rpm離心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室溫固定細胞40min,800rpm離心5min;2ml PBS重懸細胞,800rpm離心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細胞,冰上放置10min,800rpm離心5min。
(4)加入飽和劑量未標記抗體,冰上放置40min,800rpm離心5min,用2ml冷的PBS 重懸細胞,800rpm離心5min,洗去未結合一抗,重復一次。
(5)加入熒光標記(FITC)標記的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm離心5min,去上清,PBS洗滌兩次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重懸細胞;固定待測。
(7)流式細胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10 000個細胞。
C.細胞周期、細胞凋亡及DNA倍體分析樣品(PI染色)的制備:
(1)待測樣本制成單細胞懸液,然后200g離心5分鐘,棄上清。
(2)用4℃預冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小時。
(3)調整細胞濃度為106細胞/毫升,取1毫升細胞懸液,用PBS洗三次,細胞重懸于1毫升PI染液中,37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。
(4)PI染液終濃度為50微克/毫升,RNase A終濃度為20微克/毫升。
注:本方法僅供參考,如有其它要求,請在送樣前說明。
上海卓康生物科技有限公司
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