SILAC與免疫共沉淀質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation，CoIP）是一項(xiàng)基于抗體特異性識別特定抗原的這一原理研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。免疫共沉淀常用于檢驗(yàn)生理狀態(tài)下蛋白質(zhì)間的相互作用，通過與質(zhì)譜（MS）聯(lián)用可以用于鑒定發(fā)現(xiàn)新的相互作用蛋白。百泰派克利用SILAC方法分別標(biāo)記實(shí)驗(yàn)組和對照組細(xì)胞后進(jìn)行Co-IP實(shí)驗(yàn)，依靠抗原與抗體之間的專一性反應(yīng)分離得到免疫復(fù)合物；再通過LC-MS/MS來定性/定量檢測免疫復(fù)合物中的蛋白；當(dāng)實(shí)驗(yàn)組與對照組中某個(gè)蛋白質(zhì)的含量達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)差異時(shí)，判定這個(gè)蛋白質(zhì)與研究的蛋白具有相互作用，可極大降低蛋白質(zhì)互作假陽性結(jié)果可能性。SILAC技術(shù)和Co-IP-MS技術(shù)結(jié)合可用于高通量定量分析在特定情況下蛋白的互作蛋白網(wǎng)。

SILAC 的聯(lián)用從源頭引入質(zhì)量差異，降低了實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)誤差，定量信息豐富，準(zhǔn)確度高。百泰派克公司采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion質(zhì)譜平臺，Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺結(jié)合Nano-LC，推出SILAC與免疫共沉淀質(zhì)譜聯(lián)用的蛋白互作分析服務(wù)技術(shù)包裹（SILAC-based CoIP-MS），您只需要將您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康母嬖V我們并將您的細(xì)胞寄給我們，我們會負(fù)責(zé)項(xiàng)目后續(xù)所有事宜，包括細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞標(biāo)記、蛋白提取、抗體IP、效率檢測、蛋白酶切、肽段分離、質(zhì)譜分析、質(zhì)譜原始數(shù)據(jù)分析、生物信息學(xué)分析。

SILAC-based CoIP-MS實(shí)驗(yàn)流程

BTP-SILAC-based CoIP-MS 技術(shù)特點(diǎn)和優(yōu)勢

? 盡量保留蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和翻譯后修飾
? 蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的，可以避免人為的影響
? 可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物
? 高通量，可快速全面分析所有相互作用的蛋白質(zhì)
? 可與對照組對比辨別非特異結(jié)合蛋白，低假陽性
? 能比對分析出各個(gè)互作蛋白的相對豐度

SILAC-based CoIP-MS實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目樣品要求

1.您只需使用干冰將凍存細(xì)胞寄給我們即可，同時(shí)保證細(xì)胞具有可以傳代培養(yǎng)5次以上的能力；
2.如果您需要自己標(biāo)記細(xì)胞并完成細(xì)胞的刺激等處理過程，您只需要將標(biāo)記完成并且經(jīng)過處理的細(xì)胞樣品或者蛋白樣品干冰寄給我們即可；對于每個(gè)樣品，需要保證至少含有300 ug蛋白總量。

注意：樣品運(yùn)輸請使用足量的干冰運(yùn)輸，并且盡量選用較快的郵遞方式，以降低運(yùn)輸過程中樣品降解的可能性。

中/英文項(xiàng)目報(bào)告

在技術(shù)報(bào)告中，百泰派克會為您提供詳細(xì)的中英文雙語版技術(shù)報(bào)告，報(bào)告包括：

1. 實(shí)驗(yàn)步驟（中英文）
2. 相關(guān)的質(zhì)譜參數(shù)（中英文）
3. 鑒定的蛋白質(zhì)的詳細(xì)信息
4. 質(zhì)譜圖片
5. 原始數(shù)據(jù)
6. 生物信息學(xué)分析

SILAC-based CoIP-MS一站式服務(wù)

您只需下單-寄送樣品
百泰派克一站式服務(wù)完成：樣品處理-上機(jī)分析-數(shù)據(jù)分析-項(xiàng)目報(bào)告

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